雷射掃描共軛焦顯微鏡與數位光學

李家同/博幼社會福利基金會董事長;侯冠維

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顯微鏡的發明,使得人類能夠見到非常微小的物質。現代科學與現代工業,幾乎處處都能見到顯微鏡的使用,例如生物學與醫學方面,要使用顯微鏡來看見微米尺寸的細胞和染色體 (1微米=百萬分之一米),或是看見奈米等級的蛋白質和DNA (1奈米=十億分之一米)。半導體工業中的電晶體與各種電子元件也已經小到奈米等級。如果沒有精密的顯微鏡技術,科學和工業的發展都會大受影響。

圖片來源 : shutterstock、達志影像

一般的光學顯微鏡能夠把微小物品放大的原理是透過光學透鏡,請看圖1。

圖1. 光學顯微鏡;資料來源:《為台灣加油打氣專欄

任何物品要被看到,必須要有光照射到物品上面,光接著會反射到人的眼睛裡面,使人產生視覺。光學顯微鏡的原理是透過光學透鏡來改變光行走的路徑,使人看到的影像放大。以圖一為例,觀察者會在透鏡1和透鏡2之間看到一個放大的影像,這個影像其實是因為光的路線被改變了,使眼睛感覺到有一個影像存在那裡,是一種假的影像,稱為虛像。就好像我們照鏡子的時候會在鏡子裡面看到自己,也是因為光行走的路徑被改變了,使得眼睛感覺鏡子裡面有影像,鏡子裡面的影像也是一種虛像。

這種傳統的光學顯微鏡的問題在於景深 (Depth of Field) 是不夠好的,在圖一中的微小物品是有厚度的,有些地方比較高,有些比較低。假如我們想要看清楚高的位置,要調整物品和透鏡1的距離,讓顯微鏡聚焦在高的位置,但是這時候低的位置就看不清楚了。反過來說,如果我們聚焦在低的位置,那高的位置就看不清楚了。

另外一個問題是解析度問題,請看圖2。

圖2. 光散射問題;資料來源:《為台灣加油打氣專欄

理想的情況下,我們認為光是走直線的,因此從物品的不同位置發出的光,對於觀察者而言應該是可以分辨的,但是實際上光會有繞射的現象。雖然如此,對於比較大的物品來說是沒有問題的,但是當物品的尺寸小到和光的波長差不多時,就會有問題了,這時不同位置發出的光就沒有辦法分辨出來了。

在此我們要介紹「雷射掃描共軛焦顯微鏡」,這種顯微鏡能夠提升光學顯微鏡的解析度,並解決光學顯微鏡的景深問題,請看圖3。